免疫細胞によるキリングアッセイ（がん免疫療法）

⁵¹Crリリースアッセイ、LDHアッセイ、フローサイトメーターに満足されていますか？

xCELLigence^® リアルタイム細胞解析システムを使用すると、がん細胞に対する免疫細胞の傷害活性を、RIや染色試薬を用いずにラベルフリーで簡単に、しかも高感度に測定していただけます。

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ラベルフリー

アイソトープ（⁵¹Cr）、ルシフェラーゼ、（蛍光）染色試薬などを使いません。
測定時に細胞を剥がす必要もございません。

手間いらず

使用方法は至って簡単。
ターゲット細胞を播種してエフェクター細胞を加えるだけで、自動的にカイネティックデータを取得できます。

低いバックグラウンド

エフェクター細胞の生死の影響を受けづらいバックグラウンドの低いデータを得られます。

ハイスループット

最大96ウェルプレート6枚を同時あるいは別々に測定していただけます。
1タイムポイントのデータ取得は15秒以内で完了します。

長期の傷害性を評価可能

従来のアッセイ法と異なり、短期（数時間）だけでなく長期（数日）の傷害性も測定していただけます。

ビボ実験との高い相関性

生理的な条件に近い低いET比で傷害性を検出していただけます。

様々な種類のがん免疫療法の実験に

CTL療法、NK細胞療法、CAR-T療法、TCR-T療法、チェックポイント阻害剤、ADCC、BiTEsなど様々なモダリティの実験に使えます。

様々ながん免疫療法のキリングアッセイで使用実績がございます。

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ラベルフリー＆リアルタイムがん免疫アッセイの原理

金電極センサーをウェル底面に配置した専用マイクロウェルプレート（E-Plate）を使用することで、細胞接着と細胞増殖をラベルフリーで非侵襲的に連続測定していただけます。測定は常に培養環境下で行われます。

ステップ１

ターゲット細胞（接着性のがん細胞）をE-Plateに播種します。センサーからの電気抵抗シグナルはCell Index（CI）としてプロットされ、細胞のウェル底面への接着と増殖に伴って上昇します。ウェル内がほぼ100％コンフルエントとなるとCIの上昇は止まり、ほぼ水平になります。

ステップ２

次にエフェクター細胞を添加しますが、エフェクター細胞は浮遊系のためセンサーに反応せず、CIはほとんど変化しません。

ステップ３

エフェクター細胞がターゲット細胞を攻撃し、ターゲット細胞の溶解が始まると、センサーは敏感にそれを感知し正確にCIの減少として反映します。
エフェクター細胞の種類、ターゲット細胞の種類、改変抗体の種類、ET比などを異なる条件に設定した全てのウェルから同時にデータ取得がなされ、各ウェル毎のリアルタイム細胞傷害性カーブとしてソフトウェア画面上にプロットされます。

ステップ４

オプションのがん免疫実験用ソフトウェアを使用すると、通常のリアルタイムプロット（上のプロット）で表示した後、数クリックで簡単に% Cytotolysis（下のプロット）、IC₅₀、KT₅₀を算出できます。
※KT₅₀（Killing Time 50）：ターゲット細胞の半数が傷害を受けるまでの時間（エフェクター細胞がどれだけ迅速にターゲット細胞を殺すことができるかの指標）。

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