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組み換えタンパク質作製プラン

* サービス内容改訂中。近日リニューアル予定。

遺伝子配列情報をお預かりの上、発現ベクターを作製、発現確認後、大腸菌を宿主とした培養精製を実施いたします。

プラン内容

項目 内容 納期
発現ベクター構築

template(cDNAなど)受領 プライマー設計・合成

  • PCR→アガロース電気泳動にてサイズ確認
  • クローニング
    • PCR産物、ベクターDNAを制限酵素で切断
    • ライゲーション及び形質転換(宿主大腸菌:XL 1blue)
    • プラスミドDNA精製→アガロース電気泳動にてサイズ確認

シークエンシング

  • インサート両端のみワンパス解析

納品物

  • 精製プラスミドDNA、シークエンシング解析データ
4週間~
発現確認

精製プラスミドDNAをBL21(DE3)にtransform

  • コロニーをピックアップ
  • 4mL少量培養IPTG発現誘導
  • レジンを用いてのバッチ精製
  • SDS-PAGE電気泳動(可溶性・不溶性確認)
    (オプションとして発現至適条件検討を行います)
2週間~
大量培養 2リットルの培養を行い、タグの種類に応じてNi精製、glutaion-sepharose精製を行います。
(オプションにてイオン交換精製等も可能)
2週間~

※発現ベクターをお預かりの上、発現確認からの受託も対応しております。