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組み換えタンパク質作製プラン

* サービス内容改訂中。近日リニューアル予定。

遺伝子配列情報をお預かりの上、発現ベクターを作製、発現確認後、大腸菌を宿主とした培養精製を実施いたします。

プラン内容

項目 内容 納期
発現ベクター構築

template（cDNAなど）受領 プライマー設計・合成

  • PCR→アガロース電気泳動にてサイズ確認
  • クローニング
    • PCR産物、ベクターDNAを制限酵素で切断
    • ライゲーション及び形質転換（宿主大腸菌：XL 1blue）
    • プラスミドDNA精製→アガロース電気泳動にてサイズ確認

シークエンシング

  • インサート両端のみワンパス解析

納品物

  • 精製プラスミドDNA、シークエンシング解析データ
 4週間～
発現確認

精製プラスミドDNAをBL21（DE3）にtransform

  • コロニーをピックアップ
  • 4mL少量培養IPTG発現誘導
  • レジンを用いてのバッチ精製
  • SDS-PAGE電気泳動（可溶性・不溶性確認）
    （オプションとして発現至適条件検討を行います）
 2週間～
大量培養 2リットルの培養を行い、タグの種類に応じてNi精製、glutaion-sepharose精製を行います。
（オプションにてイオン交換精製等も可能）		 2週間～

※発現ベクターをお預かりの上、発現確認からの受託も対応しております。